Vor ca. 4 Wochen haben wir 34 Agarplatten (Glas) gegossen. Leider ist beim Sterilisieren im Autoklaven, nach ca. 15 min (nach Einschalten) der Heizstab verreckt (zum 3. mal
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Hier kurz eine Beschreibung wie ich die Agarplatten hergestellt habe:
- ca 500mL Wasser wurden zum köcheln gebracht und 20 g Malzextraktpulver und 2g Bierhefeflocken eingerührt.
- ca. 20g Agar wurden in 300ml lauwarmen Wasser eingerührt und die Lösung/Suspension in kochende Nährlösung eingerührt
- die Agarlösung (nach dem kochen ca. 750ml) wurden mit Wasser auf 1000ml aufgefüllt und noch einmal kurz aufgekocht
- die Agarlösung wurde mit etwas (2-3 Spatelspitzen) Zitronensäure auf ca. pH 4 angesäuert (um später Bakterienkontis zu reduzieren)
- sterile Einwegspritzen (12ml) wurden 2mal aufgezogen und somit 24ml Agarlösung in 9cm Glas-Petrischalen überführt
- die Petrischalen wurden ohne Deckel abkühlen gelassen bis der Agar verfestigt hatte und anschließend der Deckel aufgesetzt (um die Bildung von Kondenswasser zu diesem Zeitpunkt zu verhindern)
- die Petris wurden in Alufolie eingewickelt und 33 der 34 Petris in den Autoklaven gestellt und für 15 Minuten Sterilisiert (vllt max 5 min die Kerntemperatur von 121°C erreicht): eine Petri hat nicht mehr reingepasst
- Der Autoklav wurde über Nacht abkühlen gelassen um Siedeverzug und die Bildung von Kondenswasser zu reduzieren
- Der Korb mit den Petris wurde in einen Müllsack gepackt, dieser eingeschlagen und das ganze im Regal für 4 Wochen verstaut
- die Petris wurden auf einer HEPA-Werkbank Marke Eigenbau (siehe viewtopic.php?f=31&t=4202 ) ausgepackt und mit Parafilm verschlossen
- die fertigen Petris wurden 4 Tage im Kühlschrank gelagert
Bisher wurden noch keine Kontis entdeckt. Heute wird unser kleiner Arbeitskreis auf der HEPA-Werkbank versuchen mit gerade eben erworbenen Wochenmarktpilzen (Sommeraustern (vermuten wir, da die Hutfarbe weiß ist), Kräuterseitlingen, Shiitake) erfolgreich zu klonieren. Wir halten euch auf dem Laufenden!
vG
Julius